[ View menu ]

Проводка в изопропаноле

Проводка приспособлена нами к карусельному процессору фирмы Leica ТР1020, которым мы с удовольствием пользуемся уже несколько лет. Возможно, можно и на других или вручную.

Станция Реагент Экспозиция
1 50%-ный водный раствор изопропилового спирта 1 час.
2 Абсолютированный изопропанол 30 мин.
3 Абсолютированный изопропанол 30 мин.
4 Абсолютированный изопропанол 30 мин.
5 Абсолютированный изопропанол 1 час.
6 Абсолютированный изопропанол 1 час.
7 Абсолютированный изопропанол 2 час.
8 Абсолютированный изопропанол 3 час.
9 Абсолютированный изопропанол 3 час.
10 Парафин 1 час.
11 Парафин 3 час.
12 Парафин 4 час.
Итого   20 час.30 мин.

Примечание: использовать только абсолютированный 99,7° и выше изопропанол.

Также хорош (даже несколько лучше) химически чистый изопропанол (ХЧ). Другие не годятся, снижение градусности резко - катастрофически снижает качество препаратов. Никаких добавок к спирту мы не применяли.

Данный вариант проводки позволяет провести в течение суток в 1-ной корзине до 400 (!) кусочков органов (секционный материал - т.е. крупных по площади, но толщиной до 3 мм - !). Вакуумник включать не требуется. В этом варианте проводки легко применима (при необходимости) двойная загрузка, но это увеличивает время, т.к. в парафинах материал должен находиться не менее 8 часов, причем не менее 3,5 часов в чистых, следовательно на каждой станции - по 3,5 часа. Т.о. вся проводка - почти 2 дня.

Биопсии проходят быстрее.

Увеличение времени пребывания в спиртах свыше указанного не улучшает и не ухудшает качества препаратов. Критично время пребывания в парафине - его уменьшение существенно ухудшает пропитывание кусочков и средина вываливается. Это время при возможности можно увеличивать.

При замене спиртов - на 1 шаг назад. Одновременно заменяется 50% изопропанол (смесь с водой готовится из чистого спирта !). Менять - по мере загрязнения. Но после проводки более 300 кусочков - обязательно.

Мы использовали биовитрумовский Histomix.

Данная проводка по качеству выше ксилольной и ацетоновой, почти аналогичная хлороформенной, но имеется существенная экономия на реагентах, так как исключается промежуточная среда.

Не надо бояться напрямую опускать кусочки из изопропанола в парафин(!), также как из хлороформа или ксилола, минуя «каши».

20 q. 0.427 s.